生化分析儀采用一個波長檢測物質(zhì)的光吸收強度的方式稱為單波長方式。當反應(yīng)液中含有一種組分，或在混合反應(yīng)液中待測組分的吸收峰與其它共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時，可以選用。

　　在吸光度檢測中，使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。當反應(yīng)液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結(jié)果的準確性時，采用雙波長方式更好。

　　雙波長的作用：雙波長(di-wavelength)測定優(yōu)點是①消除噪音干擾;②減少雜散光影響;③減少樣品本身光吸收的干擾。從光源，到比色杯、單色器、檢測器的整個光路系統(tǒng)中，均存在著隨時間發(fā)生變化的不穩(wěn)定的檢測信號，即噪音，而雙波長檢測是同時進行的，兩種波長檢測產(chǎn)生的噪音基本上相同，因而能消除噪音干擾。當樣品中存在非化學反應(yīng)的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時，會產(chǎn)生非特異性的光吸收，而干擾測定結(jié)果的準確性。采用雙波長方式測定可以部分消除這類干擾，提高檢測的準確性。

　　次波長的確定方法：當被測物的主波長確定之后，再選擇次波長。如根據(jù)甘油三酯等干擾物吸收光譜特征，選擇次波長，使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值，而被測物在主、次波長處的光吸收值應(yīng)有較大的差異。一般來說，次波長應(yīng)大于主波長100nm。以主波長與次波長吸光度差來計算結(jié)果。

　　雙波長的具體應(yīng)用：對于某些反應(yīng)速度快且無法設(shè)置為兩點終點法的分析項目，尤其是單試劑分析中，可以利用雙波長的方式來部分消除樣品本身的光吸收干擾。目前用單試劑法測定的項目應(yīng)用雙波長的為血清總蛋白（雙縮脲法）主波長500nm，次波長576nm；血清白蛋白（溴甲酚氯法）主、次波長分別為600和700nm；鈣（偶氮砷Ⅲ法）主、次波長分別為660、770nm；磷（紫外比色法）主、次波長為340、405nm，鎂（二甲苯胺藍法）主、次波長為505和600nm。